تشخیص انگل لیشمانیا در بیماران توسط کشت nnn و pcr-rflp

مقدمه: لیشمانیوز یک بیماری عفونی انگلی با انتشار وسیع در مناطق معتدله و گرمسیری است. هدف این مطالعه به کار گیری دو روش pcr-rflp و کشت nnn (novy-nicol-mac nea) در نمونه هایی بود که اسمیر مستقیم آن ها از نظر وجود آماستیگوت منفی بود. روش ها: این مطالعه جهت بررسی و تعیین گونه های leishmania در منطقه ی اصفهان بر روی dna استخراج شده از انگل های حاصل از کشت بیماران اسمیر منفی با روش pcr-rflp (polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism) انجام شد. جهت کشت انگل مقداری ا ز نمونه ی برداشت شده از بیمار بر روی محیط nnn و rpmi 1640 برده شد. از مجموع 100 نمونه اسمیر منفی 50 نمونه در محیط کشت از نظر پزوماستیگوت های انگل leishmania مثبت شد و dna حاصل از کشت نمونه ها استخراج گردید. بعد از استخراج dna با استفاده از روشpcr-rflp تکثیر از توالی its 1 با پرایمرهای اختصاصی صورت گرفت و بعد از هضم با آنزیم haeiii ایزوله ها در مقایسه با سویه های استاندارد تعیین گونه شدند. یافته ها: از مجموع 50 نمونه ی اصفهان 46 نمونه l.major و 4 نمونه l.tropica تشخیص داده شد. نتیجه گیری: مطالعه ی حاضر نشان داد که pcr-rflp روشی حساس و دقیق برای تعیین گونه های عامل لیشمانیوز جلدی است و ضایعات مورد مطالعه در منطقه ی اصفهان ناشی از l.major و l.tropica می باشد.